Ο Ιερός λόχος συγκροτήθηκε από εθελοντές νέους, κυρίως φοιτητές από τα ξένα πανεπιστήμια.
Οι Ιερολοχίτες ήταν πεζοί, εφοδιασμένοι με καραμπίνες και ξιφολόγχες. Έφεραν στολή από μαύρο ύφασμα, με τρίχρωμο εθνόσημο. Στο κάλυμμα της κεφαλής, κάτω από το λευκό λοφίο, υπήρχε το σήμα της νεκροκεφαλής, με δυο χιαστί οστά από μέταλλο, που σήμαιναν Ελευθερία ή θάνατος.
Η σημαία του ιερού λόχου ήταν τρίχρωμη. Το κόκκινο συμβόλιζε τον πατριωτισμό, το λευκό την αδελφοσύνη και το μαύρο την θυσία. Στη μια πλευρά της σημαίας αναγραφόταν ΕΝ ΤΟΥΤΩ ΝΙΚΑ και υπήρχε η εικόνα των Αγίων Κωνσταντίνου και Ελένης. Στην άλλη πλευρά υπήρχε η εικόνα του Φοίνικα που ξεπρόβαλε από τις φλόγες και η φράση ΕΚ ΤΗΣ ΚΟΝΕΩΣ ΜΟΥ ΑΝΑΓΕΝΝΩΝΜΑΙ.
Επικεφαλής του Ιερού Λόχου ήταν ο αδελφός του Αλέξανδρου Υψηλάντη Νικόλαος, και υπασπιστής ο Ηπειρώτης Αθανάσιος Τσακάλωφ, συνιδρυτής της Φιλικής Εταιρείας.
